認識真菌熒光染色技術，從原理及技術方法開始

　　真菌熒光染色技術被廣泛應用于真菌識別、病原體檢測等領域，其實現了對真菌體內結構和代謝產物的可視化觀察。本文旨在介紹真菌熒光染色技術的原理和方法。
 

　　一、技術原理
 

　　該技術主要是以真菌體內含有的熒光染料進行染色，從而使真菌細胞產生熒光，達到觀察和檢測的目的。真菌體內含有的熒光染料主要有：伯克霍爾德胺(Berkeley’s acid)、quinacrine等。
 

　　該技術的原理是利用熒光顯微鏡(fluorescence microscope)對生物樣本中含有的熒光物質進行成像。熒光顯微鏡是一種將激發光經過標本后發射出的熒光光子轉化為圖像的高精度儀器。
 

　　二、技術方法
 

　　1.準備熒光染料
 

　　通常使用的真菌熒光染料是quinacrine或伯克霍爾德胺(Berkeley’s acid)，其中quinacrine和伯克霍爾德胺都是吸附在真菌細胞壁和細胞內膜上的熒光物質。
 

　　2.制備熒光染色液
 

　　將熒光染料溶解在染色液中，將染料均勻分布于液體中。
 

　　3.準備真菌樣本
 

　　真菌樣本可以通過培養真菌或從感染患者中獲取。真菌樣本需要先進行標本加熱處理，以殺死非真菌微生物，然后進行固定處理，并在亞甲基藍(methyl blue)溶液中處理，以防止染色液進入細胞中。
 

　　4.將染色液滴于真菌樣本上
 

　　將制備好的熒光染色液滴于真菌樣本上，并在一定時間內進行顏色反應和染色作用。
 

　　5.利用熒光顯微鏡進行觀察
 

　　用熒光顯微鏡觀察染色后的樣本，熒光染料的熒光信號可以被染色細胞表現出來。
 

　　真菌熒光染色技術是一種重要的生物學研究技術，可應用于真菌識別、病原體檢測、藥物研發等領域。該技術通過染色作用將真菌樣本中的熒光染料標記成熒光信號，用熒光顯微鏡觀察真菌結構和代謝產物的分布位置和數量，從而實現對真菌體內結構和代謝產物的可視化觀察。